Влияние масла каннабиса полного спектра действия

Valentina Degrave (Валентина Деграде), Michelle Berenice Vega Joubert (Мишель Беренис Вега Жубер), Paola Ingaramo, Daniela Sedan (Даниэла Седан), Dario Andrinolo (Дарио Андриноло), Maria Eugenia D'Alessandro (Мария Евгения Д'Алессандро), Maria Eugenia Oliva

Влияние масла каннабиса полного спектра действия с соотношением каннабидиол: тетрагидроканнабинол 2: 1 на механизмы, участвующие в стеатозе печени и окислительном стрессе у крыс, которых кормили богатой сахарозой пищей

Мед Каннабиноиды каннабиса (2023) 6 (1): 170-183.

Effects of Full-Spectrum Cannabis Oil with a Cannabidiol:Tetrahydrocannabinol 2:1 Ratio on the Mechanisms Involved in Hepatic Steatosis and Oxidative Stress in Rats Fed a Sucrose-Rich Diet. Med Cannabis Cannabinoids (2023) 6 (1): 170–183.

https://doi.org/10.1159/000534610

АННОТАЦИЯ

Введение: 

Целью данного исследования был анализ влияния масла каннабиса (каннабидиол: тетрагидроканнабинол [CBD: THC] в соотношении 2: 1) на механизмы, участвующие в стеатозе печени и окислительном стрессе в экспериментальной модели метаболического синдрома (МС), вызванного богатой сахарозой диетой (SRD). Мы предположили, что неинвазивное пероральное введение масла каннабиса улучшает стеатоз печени за счет снижения активности липогенных ферментов и увеличения активности фермента карнитинпальмитоилтрансферазы-1 (CPT-1), участвующей в митохондриальном окислении жирных кислот. Кроме того, масло каннабиса уменьшает окислительный стресс печени посредством регуляции основных участвующих регуляторных факторов, ядерного фактора эритроида 2 (NrF2) и ядерного фактора-kB (NF-kB) p65. 

Для проверки этой гипотезы соответствующую экспериментальную модель рассеянного склероза индуцировали путем кормления крыс SRD в течение 3 недель. Методы: Самцов крыс линии Вистар кормили следующими диетами в течение 3 недель: эталонный рацион: стандартная коммерческая лабораторная диета, SRD и SRD + масло каннабиса: неинвазивное пероральное введение масла каннабиса в дозе 1 мг / кг массы тела ежедневно. Масло каннабиса полного спектра действия содержит общее количество каннабиноидов CBD: THC в соотношении 2: 1. 

Уровни глюкозы, триглицеридов, общего холестерина, холестерина ЛПВП, холестерина ЛПНП, мочевой кислоты, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы (AP), N-арахидоноилэтаноламина или анандамида и 2-арахидоноилглицеролэндоканнабиноидов в сыворотке крови, оценивали уровни активных веществ тиобарбитуровой кислоты (TBARS) и неферментативную антиоксидантную способность (антиоксидантная способность, восстанавливающая ионы железа (FRAP)). В ткани печени: гистология, оценка активности неалкогольной жировой болезни печени (NAS), содержание триглицеридов и холестерина, активность липогенных ферментов (синтазы жирных кислот, ацетил-КоА карбоксилазы, яблочного фермента и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы), фермента, связанного с окислением жирных кислот в митохондриях (CPT-1), активных форм кислорода, TBARS, FRAP, активность ферментов глутатиона, каталазы, глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы. Уровни 4-гидроксиноненала, NrF2 и NF-κB p65 были проанализированы методом иммуногистохимии. 

Результаты: Результаты показали, что у крыс, которых кормили SRD, развились дислипидемия, повреждение печени, стеатоз печени (повышение уровня ключевых ферментов, связанных с синтезом жирных кислот novo, и снижение уровня ключевых ферментов, связанных с окислением жирных кислот в митохондриях), перекисное окисление липидов и окислительный стресс. Экспрессия NrF2 в печени была значительно снижена, а экспрессия NF-κB p65 увеличена. Прием масла каннабиса улучшал дислипидемию, повреждение печени, стеатоз печени, перекисное окисление липидов (улучшение ферментов, участвующих в липидном обмене) и окислительный стресс. В ткани печени экспрессия NrF2 увеличилась, а экспрессия NF-κB p65 была снижена. Заключение: Настоящее исследование выявило новые аспекты повреждения печени и стеатоза, перекисного окисления липидов и окислительного стресса у крыс с дислипидемией, резистентных к инсулину, получавших SRD. Мы продемонстрировали новые свойства и молекулярные механизмы масла каннабиса (CBD: THC, соотношение 2: 1) на липотоксичность и окислительный стресс печени в экспериментальной модели MS.

Выдержки:

Приготовление и характеристика масла каннабиса

Масло каннабиса было получено из высушенных соцветий сорта Cannabis sativa CAT1, выращенного в центре экологических исследований (CIM-CONICET-UNLP) (RESOL-2021-3236-APN-MS). вкратце, для получения нейтральных каннабиноидов соцветия сначала декарбоксилировали в духовке (145 ° C) в течение 7 минут. После этого была проведена спиртовая экстракция (10 мл этанола при 96° на грамм соцветия), а затем этанол выпарили с помощью Ротавапора (Buchi R 3000). 

Полученную смолу разводили в кукурузном масле и количественное определение каннабиноидов в масле проводили методами ВЭЖХ / УФ-DAD. Масло каннабиса содержит 0,60 мг / мл CBD и 0,43 мг / мл THC, при соотношении CBD: THC 2: 1. Наконец, было проведено адекватное разведение для получения рабочего масла с концентрацией 1 мг /мл.

Для анализа каннабиноидов методом ВЭЖХ / УФ-DAD экстракцию проводили 96 ° этанолом (Purocol) с использованием 20 мл / г масла и встряхивания в вихревом режиме (10 мин) для обеспечения эффективного контакта и экстракции. Затем полученный раствор центрифугировали в течение 10 мин при 5000 об/мин (центрифуга Rolco) для отделения спиртового экстракта от нерастворимых остатков. Наконец, спиртовую фазу отфильтровали с использованием фильтров Osmonics 45 lm для дальнейшего анализа методом ВЭЖХ / УФ-DAD.

Аналитическое определение профилей каннабиноидов: каннабиноиды изучали методом ВЭЖХ / UV-DAD (Shimadzu LC-20A) с использованием колонки Thermo Hypersil BDS C18 (150 × 4,6 мм, 5 лм) в соответствии с аналитической методикой, описанной De Backer et al. [27] с небольшими изменениями [28]. Подвижная фаза состояла из А: метанола и В: 25 мМ раствора ацетата аммония. Градиент составлял 75% А: 1 мин, 75-95% А: 15 мин, 95% А: 2 мин, 95-75% А: 2 мин и 75% А: 5 мин. Общее время действия составило 25 мин, расход - 1 мл / мин, а обнаружение - при 205 нм. Стандарты для анализа каннабиноидов были приобретены у корпорации Cerilliant.

Выводы:

Настоящее исследование демонстрирует, что дислипидемия, повреждение печени, стеатоз печени, перекисное окисление липидов и окислительный стресс сопровождаются изменениями экспрессии NrF2 и NF-κB в печени крыс, получавших SRD, в краткосрочной перспективе. Кроме того, масло каннабиса полного спектра действия (КБР: ТГК в соотношении 2: 1) продемонстрировало новые механизмы действия, смягчая дислипидемию, повреждение печени и стеатоз печени, вызванные SRD. Эти эффекты связаны со снижением активности липогенных ферментов и увеличением активности фермента CPT-1, участвующего в митохондриальном окислении жирных кислот. 

Кроме того, масло каннабиса может ослаблять перекисное окисление липидов и окислительный стресс посредством регуляции основных участвующих регуляторных факторов, NrF2 и NF-κB p65. Активация фактора транскрипции NrF2, сопровождающаяся инактивацией NF-κB. Кроме того, наши результаты показывают, что масло каннабиса полного спектра действия с соотношением КБР: ТГК 2: 1 может служить естественным нутрицевтическим средством для предотвращения метаболических нарушений, связанных со стеатозом печени, окислительным стрессом и НАСГ. Мы не можем исключить возможность того, что другие компоненты масла каннабиса, такие как терпены, флавоноиды и алкалоиды, также могут способствовать благоприятным эффектам, обнаруженным в настоящем исследовании. Наконец, хотя эти результаты и являются многообещающими, они требуют дальнейшего изучения, прежде чем экстраполировать использование масла каннабиса полного спектра действия в качестве дополнительного нутрицевтика, который мог бы помочь в лечении некоторых метаболических нарушений у людей.